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普通显微镜与荧光显微镜的区别比较

发布时间:2015-04-03作者:器械科


很多人包括一些显微镜使用人员经常不知道荧光显微镜与普通显微镜的区别到底是什么,主要还是对于荧光显微镜的认识不清楚,本文主要是在通过

荧光显微镜与普通显微镜的对比分析,让大家对于荧光显微镜有一个更加深刻的认识!


荧光显微镜是免疫荧光细胞化学的基本工具。它是由光源、滤板系统和光学系统等主要部件组成。它不是通过普通光源的照明观察标本,

而是利用一定波长的光激发标本发射荧光,通过物镜和目镜系统放大以观察标本的荧光图像。


荧光显微镜以紫外线为光源,用以照射被检测物体,使被检物发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。荧光显微镜广泛用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞内有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽然不发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射也可以发出荧光。


荧光显微镜也是光学显微镜的一种,但二者的主要区别在于激发波长不同。按光的波长范围分为UV激发法(使用紫外线照明法)和BV激发法(使用蓝紫光)两种。UV激发法是用短于400nm的近紫外光进行激发。UV激发法不存在可见的激发光,所以被观察的荧光呈现该染料固有的荧光,容易判别标本上的特异荧光和背景组织的自身荧光。BV激发法是以404nm、434nm为中心的紫外至蓝光进行激发,BV激发法使用蓝光照射标本,所以荧光观察系统的截止滤光片必须使用可完全阻断蓝光并可充分通过所需绿、黄荧光的滤光片。用于荧光抗体法的荧光色素。因此决定了荧光显微镜与普通光学显微镜结构和使用方法上的不同。


荧光显微镜与普通显微镜的区别主要有以下三点:


1.照明方式通常为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;

  

2.光源为紫外光,波长较短,分辨力高于普通显微镜; 

 

3.有两个特殊的滤光片,光源前的用以滤除可见光,目镜和物镜之间的用于滤除紫外线,用以保护人目。


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